دستورالعمل کوه اسلاید
قبل از شروع فرآیند آماده سازی اسلاید ، اطمینان حاصل کنید که تمام مواد لازم ، از جمله اسلایدها ، لغزش های پوشش ، قطره قطره یا پیپت و هر ماده شیمیایی یا لکه هایی را که قصد استفاده از آنها را دارید ، جمع آوری کرده اید.
دو نوع اسلاید اصلی وجود دارد که با آنها کار خواهید کرد:
1. اسلاید شیشه ای مسطح استاندارد.
2. افسردگی یا چاه اسلاید ، که دارای یک چاه کوچک یا تورفتگی در مرکز آن است که برای نگه داشتن قطره آب یا ماده مایع طراحی شده است. اینها به طور معمول گران تر هستند و معمولاً بدون لغزش پوشش استفاده می شوند.
اسلایدهای استاندارد را می توان از پلاستیک یا شیشه ای ساخت ، اندازه 1 3 3 اینچ (25 75 75 میلی متر) و ضخامت 1 تا 1.2 میلی متر.
برای اسلایدهای مرطوب ، یک چسباندن روکش یا شیشه پوشش ضروری است. این یک تکه شیشه ای فوق العاده نازک ، مربع (یا پلاستیک) است که با دقت روی قطره نمونه قرار می گیرد. بدون پوشش ، تنش سطح باعث می شود قطرات شکل گنبدی ایجاد شود. این پوشش این تنش را ضد می کند ، و اطمینان حاصل می کند که نمونه برای معاینه دقیق با حداقل تمرکز قرار دارد. علاوه بر این ، این پوشش به عنوان یک حفاظت عمل می کند و مانع از دخالت لنزهای عینی با افت نمونه می شود.
اسلاید میکروسکوپ
مكانكسكروسكس به روشهای استفاده شده برای ایمن كردن اسلایدهای میکروسکوپ یا نمونه هایی برای مشاهده اشاره دارد. در درجه اول چهار نوع وجود دارد:
1. اسلاید مونتاژ:اینها رایج ترین نوع هستند و شامل قرار دادن یک نمونه بر روی یک اسلاید شیشه ای مسطح است که اغلب با استفاده از یک محیط نصب (مانند مایع یا ژل) برای نگه داشتن آن در جای خود قرار می گیرد. سپس برای محافظت از نمونه ، یک لغزش پوشش اضافه می شود و یک سطح صاف برای مشاهده فراهم می کند.
2. حفره یا چاه ها:این اسلایدها دارای یک چاه کوچک یا افسردگی در مرکز هستند که برای نگه داشتن قطره مایع مانند آب یا مایع نصب تخصصی طراحی شده است. آنها هنگام کار با نمونه هایی که نیاز به غوطه وری در مایع دارند استفاده می شوند.
3. مونت های موقت:این مونت ها برای ذخیره سازی طولانی مدت یا مشاهده منظور نشده اند. آنها شامل روشهای ساده و سریع مانند قرار دادن نمونه بر روی اسلاید با قطره آب هستند. آنها اغلب برای مشاهده موجودات زنده یا نمونه های حساس به زمان استفاده می شوند.
4. مونت های دائمی:اینها برای ذخیره سازی و مشاهده طولانی مدت طراحی شده اند. آنها شامل روشهای پیچیده تری از جمله استفاده از رسانه های نصب شده تخصصی هستند که به مرور زمان سخت می شوند و نمونه را در یک محیط شفاف قرار می دهند. این نوع کوه اغلب برای اسلایدهای آموزشی و تحقیقات علمی استفاده می شود.
هر نوع کوه دارای کاربردهای خاص خود است و بر اساس ماهیت نمونه و هدف مشاهده انتخاب می شود.
چهار روش مشترک برای سوار کردن اسلاید میکروسکوپ
بسته به نوع نمونه و هدف مشاهده ، چندین روش متداول برای نصب اسلاید میکروسکوپ وجود دارد. در اینجا چهار روش مشترک برای نصب اسلاید میکروسکوپ وجود دارد:
نصب خشک:
روش: در این روش ، یک نمونه مستقیماً روی یک اسلاید میکروسکوپ تمیز و خشک قرار می گیرد. این ماده اغلب برای نمونه هایی استفاده می شود که به رطوبت اضافی یا غوطه وری در مایع احتیاج ندارند.
برنامه ها: نصب خشک برای مشاهده نمونه های جامد مانند قطعات گیاه ، مو یا مواد معدنی مناسب است.
نصب مرطوب:
روش: یک قطره کوچک از مایع (معمولاً آب یا یک مایع نصب تخصصی) روی اسلاید قرار می گیرد و نمونه آن به این قطره اضافه می شود. برای جلوگیری از خشک شدن و اعوجاج ، یک لغزش روکش به آرامی روی نمونه قرار می گیرد.
برنامه ها: از مونتاژهای مرطوب برای مشاهده موجودات زنده ، سلول ها یا نمونه هایی که نیاز به غوطه وری در مایع دارند استفاده می شود.
نصب کدو حلوایی:
روش: این تکنیک شامل قرار دادن یک نمونه بر روی اسلاید و سپس فشار دادن آن به آرامی با یک لغزش درپوش یا یک اسلاید دیگر برای صاف کردن آن است. این معمولاً برای بافت های نرم یا قطعات گیاهی ظریف برای ایجاد یک لایه نازک و شفاف برای مشاهده استفاده می شود.
برنامه های کاربردی: از مونتاژ کدو حلوایی برای بررسی بافت ها ، به ویژه در زیست شناسی گیاه استفاده می شود.
نصب smear:
روش: مقدار کمی از نمونه (معمولاً یک ماده مایع یا نیمه مایع) به طور باریک و به طور مساوی در یک اسلاید پخش می شود ، که اغلب از لبه اسلاید دیگر استفاده می شود. سپس مجاز به خشک شدن هوا یا ممکن است با یک ماده شیمیایی ثابت شود.
برنامه های کاربردی: مونت های اسمیر معمولاً برای مشاهده میکروارگانیسم هایی مانند باکتری ها یا برای تهیه اسمیرهای خون برای میکروسکوپ استفاده می شود.
این روشها به انواع مختلف نمونه ها و الزامات خاص آنها برای مشاهده ارائه می شود. انتخاب تکنیک نصب بستگی به عواملی مانند ماهیت نمونه ، هدف مشاهده و سطح مورد نظر جزئیات و وضوح دارد.
لکه های میکروسکوپ
لکه های میکروسکوپ ، همچنین به عنوان لکه های بیولوژیکی یا رنگ ها شناخته می شوند ، مواد مورد استفاده در میکروسکوپی برای تقویت کنتراست و دید نمونه های بیولوژیکی هستند. آنها با اتصال انتخابی به اجزای سلولی خاص مانند پروتئین ها ، اسیدهای نوکلئیک یا لیپیدها کار می کنند که امکان تجسم و تمایز آسانتر از ساختارهای سلولی را فراهم می کند. در اینجا انواع متداول لکه های میکروسکوپ آورده شده است:
1. هماتوکسیلین و ائوزین (H&E):
نوع: لکه ترکیبی.
استفاده: یکی از پرکاربردترین لکه های بافت شناسی ، هماتوکسیلین هسته های هسته ای هسته ای هسته ای را لکه دار می کند ، در حالی که ائوزین سیتوپلاسم و برخی از ساختارهای خارج سلولی را صورتی می کند.
2. متیلن آبی:
نوع: رنگ اساسی.
استفاده: رنگهای هسته ای سلول را لکه دار می کنند. معمولاً برای مطالعات سیتولوژی عمومی و میکروبیولوژی استفاده می شود.
3. Giemsa:
نوع: لکه ترکیبی.
استفاده: برای رنگ آمیزی سلولهای خونی ، اجزای هسته ای و سیتوپلاسمی را در طیف وسیعی از رنگ ها متمایز می کند و امکان شناسایی انواع مختلف سلول را فراهم می آورد.
4. لکه گرم:
نوع: لکه ترکیبی.
استفاده: بین دو دسته اصلی باکتری ها: گرم مثبت (که لکه های بنفش کریستالی را حفظ می کند) و گرم منفی (که باعث ایجاد ضد سافرانین می شود) متمایز می شود.
5. لکه رایت:
نوع: لکه ترکیبی.
استفاده: در درجه اول برای لکه های خون مورد استفاده قرار می گیرد ، این لکه امکان تمایز انواع سلول های خونی و شناسایی ناهنجاری ها را فراهم می کند.
6. ید لوگول:
نوع: لکه مبتنی بر ید.
استفاده: در رابطه با ید گرام استفاده می شود ، می توان از آن برای تقویت تضاد ساختارهای سلولی خاص استفاده کرد.
7. روغن قرمز O:
نوع: رنگ لیپوفیلی.
استفاده: به طور خاص به لیپیدها متصل می شود ، و آن را برای رنگ آمیزی ساختارهای مانند قطرات چربی در سلول ها مفید می کند.
8. اسید شیف دوره ای (PAS):
نوع: لکه مبتنی بر واکنش شیمیایی.
استفاده: با کربوهیدرات ها ، ساختارهای برجسته مانند گلیکوژن ، مخاط و سایر گلیکوپروتئین ها واکنش نشان می دهد.
9. Toluidine Blue:
نوع: رنگ اساسی.
استفاده: اجزای اسیدی در سلول ها و بافت ها ، از جمله گرانول های ماست سلول و اسیدهای نوکلئیک.
10. صفرانین:
نوع: رنگ اساسی.
استفاده: به عنوان ضدعفونی کننده در رنگ آمیزی گرم برای رنگ آمیزی باکتری های گرم منفی استفاده می شود.
اینها فقط چند نمونه هستند ، و بسیاری از لکه های تخصصی دیگر برای اهداف خاص در میکروسکوپ مانند لکه های ویژه برای بافت های همبند ، الیاف عصبی یا ساختارهای سلولی خاص استفاده می شوند. انتخاب لکه به نوع نمونه و اطلاعات مورد نیاز از معاینه میکروسکوپی بستگی دارد.
مراحل رنگ آمیزی میکروسکوپ
1. با تهیه یک اسلاید کوه مرطوب ، قرار دادن نمونه خود را روی یک اسلاید میکروسکوپ تمیز شروع کنید.
2. با استفاده از قطره چشم یا پیپت چشم ، قطره ای از لکه انتخاب شده را با دقت جمع کنید.
3. این قطره لکه را در لبه بیرونی لغزش پوشش خود قرار دهید ، و اطمینان حاصل کنید که آن را با لبه اسلاید تماس می گیرد.
4. برای تسهیل توزیع یکنواخت لکه ، یک تکه دستمال یا حوله کاغذی را در طرف مقابل لغزش پوشش قرار دهید و آن را محکم به لبه فشار دهید.
5. در صورت لزوم ، یک قطره لکه اضافی را برای تضمین پوشش کامل نمونه خود اعمال کنید.
6. اسلاید شما اکنون کاملاً برای مشاهده در زیر میکروسکوپ آماده شده است.
