تکنیک های تهیه نمونه های سلول اسپرم برای میکروسکوپ دو چشمی چیست؟

تهیه نمونه های سلول اسپرم برای میکروسکوپ دو چشمی یک فرآیند دقیق است که نیاز به دقت و درک خوبی از تکنیک های درگیر دارد. به عنوان تأمین کننده میکروسکوپ های دو چشمی با کیفیت بالا ، از جملهمیکروسکوپ بدن دو چشمیبامیکروسکوپ دو چشمی ترکیبوتمیکروسکوپ دو چشمی بیولوژیکی، من در روش هایی برای اطمینان از آماده سازی بهینه نمونه برای مشاهده شفاف و دقیق ، آگاه هستم.

مجموعه نمونه های اسپرم

اولین قدم برای تهیه نمونه های سلول اسپرم ، جمع آوری مناسب نمونه های اسپرم است. متداول ترین روش از طریق استمناء در یک ظرف استریل است. برای جلوگیری از آلودگی ، پیروی از پروتکل های بهداشتی سخت در حین جمع آوری بسیار مهم است. نمونه باید پس از یک دوره پرهیز جنسی ، معمولاً 2 - 7 روز جمع آوری شود ، زیرا این می تواند بر کیفیت و کمیت اسپرم تأثیر بگذارد.

پس از جمع آوری نمونه ، باید در دمای بدن (حدود 37 درجه سانتیگراد) نگه داشته شود تا اینکه آماده پردازش شود. این امر می تواند با قرار دادن ظرف در یک مکان گرم ، مانند زیر بغل یا در یک نمونه مخصوص طراحی شده ، حاصل شود. تأخیر در پردازش می تواند منجر به تغییر در تحرک اسپرم و زنده ماندن شود ، که پارامترهای مهمی برای مشاهده در زیر میکروسکوپ هستند.

ارزیابی اولیه نمونه

قبل از تهیه نمونه برای معاینه میکروسکوپی ، ارزیابی اولیه سریع نمونه ضروری است. این شامل ارزیابی حجم ، رنگ و قوام مایع منی است. حجم مایع منی معمولی از 1.5 تا 5.0 میلی لیتر است. رنگ به طور معمول سفید است - خاکستری ، و قوام باید در ابتدا چسبناک باشد اما باید ظرف 15 تا 30 دقیقه پس از جمع آوری مایع شود.

یک بازرسی بصری ساده همچنین می تواند نشانه ای از ناهنجاری های احتمالی را نشان دهد. به عنوان مثال ، یک رنگ زرد مایل به زرد یا سبز ممکن است وجود عفونت را نشان دهد ، در حالی که حجم بسیار کم یا کمبود مایع می تواند نشانگر موضوعات اساسی بهداشت باشد.

تهیه اسلایدهای میکروسکوپ

برای تهیه نمونه های سلول اسپرم برای میکروسکوپ دو چشمی ، اسلایدهای میکروسکوپ تمیز و روکش ها ضروری هستند. اسلایدها و روکش ها باید از گرد و غبار ، گریس و هرگونه آلودگی عاری باشند. آنها را می توان با پاک کردن آنها با یک پارچه بدون پارچه و یک محلول تمیز کردن مناسب مانند اتانول تمیز کرد.

یکی از روشهای متداول تهیه نمونه ، تکنیک کوه مرطوب است. یک قطره کوچک (معمولاً در حدود 5 - 10 میکرولیتر) از نمونه اسپرم مخلوط شده در مرکز یک اسلاید میکروسکوپ تمیز با استفاده از میکروپیپت قرار می گیرد. سپس یک پوشش پوشش با دقت روی قطره با زاویه قرار می گیرد تا از به دام انداختن حباب های هوا جلوگیری شود. لبه های پوشش را می توان با لاک ناخن یا یک محیط ویژه نصب برای جلوگیری از تبخیر و نگه داشتن نمونه در هنگام مشاهده مهر و موم کرد.

تکنیک های رنگ آمیزی

رنگ آمیزی می تواند باعث افزایش دید سلولهای اسپرم و ساختارهای داخلی آنها شود. چندین روش رنگ آمیزی در دسترس است که هر کدام دارای مزایای خاص خود هستند.

ائوزین - لکه نیگوسین

لکه Eosin - Nigrosin یک روش محبوب برای ارزیابی زنده ماندن اسپرم است. ائوزین یک رنگ قرمز است که سلولهای اسپرم مرده را لکه دار می کند ، در حالی که نیگروسین یک رنگ سیاه است که زمینه متضاد را فراهم می کند. برای انجام این لکه ، یک قطره کوچک از محلول ائوزین با حجم مساوی از نمونه اسپرم روی یک اسلاید مخلوط می شود. پس از یک دوره جوجه کشی کوتاه (معمولاً 30 - 60 ثانیه) ، قطره ای از محلول نیگروسین اضافه می شود و مخلوط به طور مساوی در سراسر اسلاید با استفاده از اسلاید دیگر پخش می شود. سپس اسلاید هوا خشک شده و در زیر میکروسکوپ دو چشمی قابل مشاهده است. سلولهای اسپرم زنده سفید به نظر می رسند ، در حالی که سلولهای اسپرم مرده رنگ قرمز رنگ می شوند.

پاپ اسمیر

لکه Papanicolaou یک روش رنگ آمیزی پیچیده تر است که می تواند اطلاعات مفصلی در مورد مورفولوژی اسپرم ارائه دهد. این لکه شامل چندین مرحله از جمله تثبیت ، کم آبی و رنگ آمیزی با یک سری رنگ است. لکه Papanicolaou می تواند قسمت های مختلف سلول اسپرم مانند سر ، میانه قطعه و دم را برجسته کند و امکان ارزیابی دقیق تر از ناهنجاری های مورفولوژیکی را فراهم می کند.

تنظیم میکروسکوپ دو چشمی

پس از تهیه نمونه ، زمان آن رسیده است که میکروسکوپ دو چشمی را برای مشاهده بهینه تنظیم کنیم. ابتدا میکروسکوپ باید بر روی یک سطح پایدار تنظیم شود و به آن وصل شود. لنزهای هدف مناسب باید انتخاب شوند ، با کمترین بزرگنمایی (معمولاً 10 برابر) برای یافتن سلول های اسپرم.

تمرکز باید با استفاده از دستگیره های درشت و تمرکز خوب تنظیم شود. فاصله متقابل چشم های دو چشمی باید تنظیم شود تا با جداسازی چشم کاربر مطابقت داشته باشد. روشنایی نیز باید تنظیم شود تا روشنایی یکنواخت و روشن در سراسر نمونه فراهم شود. این کار را می توان با تنظیم دیافراگم کندانسور و شدت منبع نور انجام داد.

با افزایش بزرگنمایی (به عنوان مثال ، به 40x یا 100x) ، ویژگی های دقیق تر سلولهای اسپرم قابل مشاهده است. با این حال ، در بزرگنمایی های بالاتر ، عمق میدان کاهش می یابد ، و ممکن است استفاده از دستگیره فوکوس خوب بیشتر برای حفظ سلولها لازم باشد.

مشاهده و تجزیه و تحلیل

در زیر میکروسکوپ دو چشمی ، پارامترهای مختلف سلولهای اسپرم قابل مشاهده و تجزیه و تحلیل است.

تحرک اسپرم

تحرک اسپرم به توانایی سلول های اسپرم در حرکت اشاره دارد. می توان آن را به درجه های مختلف ، مانند تحرک مترقی (اسپرم در یک خط مستقیم) ، تحرک غیر مترقی (اسپرم در یک حرکت غیر خطی یا دایره ای) و عدم تحرک (اسپرم اصلاً حرکت نمی کند) طبقه بندی کرد. برای ارزیابی تحرک ، حداقل 200 سلول اسپرم باید شمارش شود و درصد اسپرم با تحرک پیشرونده ، تحرک غیر پیشرو و عدم تحرک مشخص شود.

غلظت اسپرم

غلظت اسپرم تعداد سلولهای اسپرم در میلی لیتر مایع منی است. می توان با شمارش تعداد سلولهای اسپرم در یک حجم شناخته شده از نمونه با استفاده از هموسیتومتر یا یک محفظه شمارش تخصصی تخمین زد. هموسیتومتر یک اسلاید کالیبره شده با یک الگوی شبکه است که امکان شمارش دقیق سلول را فراهم می کند.

مورفولوژی اسپرم

مورفولوژی اسپرم به شکل و ساختار سلولهای اسپرم اشاره دارد. سلولهای اسپرم طبیعی دارای یک سر بیضی شکل ، یک قطعه میانی و دم بلند هستند. ناهنجاری های موجود در مورفولوژی می تواند شامل سرهای بزرگ یا کوچک ، سرهای مضاعف ، دم خمیده یا قطعات مفقود باشد. با مشاهده تعداد کافی از سلولهای اسپرم (معمولاً حداقل 200) ، درصد سلولهای اسپرم شکل طبیعی را می توان تعیین کرد.

کنترل کیفیت و مستندات

برای اطمینان از صحت و قابلیت اطمینان نتایج ، اقدامات کنترل کیفیت باید در دست باشد. این شامل کالیبراسیون منظم میکروسکوپ ، نگهداری مناسب تجهیزات و استفاده از روشهای استاندارد برای تهیه و تجزیه و تحلیل نمونه است.

مستندات مشاهدات نیز مهم است. نتایج حاصل از تجزیه و تحلیل سلول اسپرم ، از جمله تحرک ، غلظت و مورفولوژی ، باید به طور دقیق ثبت شود. این مستندات می تواند برای اهداف تشخیصی ، تحقیق یا برای نظارت بر پیشرفت درمان باروری بیمار استفاده شود.

پایان

تهیه نمونه های سلول اسپرم برای میکروسکوپ دو چشمی یک فرآیند چند مرحله ای است که نیاز به توجه به جزئیات و تکنیک مناسب دارد. از جمع آوری نمونه تا مشاهده میکروسکوپی نهایی ، هر مرحله نقش مهمی در به دست آوردن نتایج دقیق و معنی دار دارد.

ما به عنوان تأمین کننده میکروسکوپ های دو چشمی با کیفیت بالا ، اهمیت تهیه تجهیزات قابل اعتماد برای این نوع معاینه را درک می کنیم. مامیکروسکوپ بدن دو چشمیبامیکروسکوپ دو چشمی ترکیبوتمیکروسکوپ دو چشمی بیولوژیکیبرای پاسخگویی به نیازهای متخصصان در زمینه طب تولید مثل و تحقیقات طراحی شده اند.

اگر علاقه مند به خرید میکروسکوپ دو چشمی با کیفیت بالا برای معاینه نمونه سلول اسپرم هستید یا در مورد تکنیک های موجود سؤالی دارید ، ما از شما دعوت می کنیم تا برای بحث و تهیه بیشتر با ما تماس بگیرید. تیم متخصصان ما آماده است تا در یافتن مناسب ترین میکروسکوپ برای نیازهای خاص شما به شما کمک کند.

منابع

• سازمان بهداشت جهانی. (2021). دفترچه راهنمای آزمایشگاه برای معاینه و پردازش مایع منی انسان ، چاپ ششم.
• کوپر ، TG و همکاران. (2010). ارزش های مرجع سازمان بهداشت جهانی برای خصوصیات مایع منی انسان. بروزرسانی تولید مثل انسانی ، 16 (3) ، 231 - 245.
• Amann ، RP ، & Howards ، SS (2000). کتابچه راهنمای آزمایشگاه برای بررسی مایع منی انسان و اسپرم - تعامل مخاط گردن رحم ، چاپ چهارم. باروری و استریل ، 73 (5) ، 863 - 872.